Η Κινεζική Φαρμακοποιία (έκδοση 2020) απαιτεί ότι το μεθανολικό εκχύλισμα του YCH δεν πρέπει να είναι μικρότερο από 20,0% [2], χωρίς να προσδιορίζονται άλλοι δείκτες αξιολόγησης ποιότητας. Τα αποτελέσματα αυτής της μελέτης δείχνουν ότι τα περιεχόμενα των μεθανολικών εκχυλισμάτων των άγριων και των καλλιεργούμενων δειγμάτων πληρούσαν και τα δύο το πρότυπο της φαρμακοποιίας και δεν υπήρχε σημαντική διαφορά μεταξύ τους. Ως εκ τούτου, δεν υπήρχε εμφανής διαφορά ποιότητας μεταξύ άγριων και καλλιεργούμενων δειγμάτων, σύμφωνα με αυτόν τον δείκτη. Ωστόσο, οι περιεκτικότητες σε ολικές στερόλες και ολικά φλαβονοειδή στα άγρια δείγματα ήταν σημαντικά υψηλότερες από αυτές στα καλλιεργούμενα δείγματα. Περαιτέρω μεταβολομική ανάλυση αποκάλυψε άφθονη ποικιλομορφία μεταβολιτών μεταξύ των άγριων και των καλλιεργούμενων δειγμάτων. Επιπλέον, εξετάστηκαν 97 σημαντικά διαφορετικοί μεταβολίτες, οι οποίοι παρατίθενται στοΣυμπληρωματικός Πίνακας S2. Μεταξύ αυτών των σημαντικά διαφορετικών μεταβολιτών είναι η β-σιτοστερόλη (το αναγνωριστικό είναι M397T42) και τα παράγωγα κερκετίνης (M447T204_2), τα οποία έχουν αναφερθεί ότι είναι δραστικά συστατικά. Συστατικά που δεν είχαν αναφερθεί προηγουμένως, όπως η τριγωνελίνη (M138T291_2), η βεταΐνη (M118T277_2), η φουστίνη (M269T36), η ροτενόνη (M241T189), η αρκτιίνη (M557T165) και το λογανικό οξύ (M49T) περιλαμβάνονταν επίσης μεταξύ των διαφορετικών μεταβολιτών. Αυτά τα συστατικά παίζουν διάφορους ρόλους στην αντιοξειδωτική, αντιφλεγμονώδη, σάρωση των ελεύθερων ριζών, κατά του καρκίνου και στη θεραπεία της αθηροσκλήρωσης και, ως εκ τούτου, μπορεί να αποτελούν υποτιθέμενα νέα ενεργά συστατικά στο YCH. Η περιεκτικότητα σε δραστικά συστατικά καθορίζει την αποτελεσματικότητα και την ποιότητα των φαρμακευτικών υλικών [7]. Συνοπτικά, το εκχύλισμα μεθανόλης ως ο μόνος δείκτης αξιολόγησης ποιότητας YCH έχει ορισμένους περιορισμούς και πιο συγκεκριμένοι δείκτες ποιότητας πρέπει να διερευνηθούν περαιτέρω. Υπήρχαν σημαντικές διαφορές στις συνολικές στερόλες, τα ολικά φλαβονοειδή και το περιεχόμενο πολλών άλλων διαφορικών μεταβολιτών μεταξύ της άγριας και της καλλιεργούμενης YCH. Έτσι, υπήρχαν δυνητικά κάποιες ποιοτικές διαφορές μεταξύ τους. Ταυτόχρονα, τα δυνητικά ενεργά συστατικά που ανακαλύφθηκαν πρόσφατα στο YCH ενδέχεται να έχουν μια σημαντική τιμή αναφοράς για τη μελέτη της λειτουργικής βάσης του YCH και την περαιτέρω ανάπτυξη των πόρων του YCH.
Η σημασία των γνήσιων φαρμακευτικών υλικών έχει αναγνωριστεί από καιρό στη συγκεκριμένη περιοχή προέλευσης για την παραγωγή κινεζικών φυτικών φαρμάκων εξαιρετικής ποιότητας [
8]. Η υψηλή ποιότητα είναι ένα βασικό χαρακτηριστικό των γνήσιων φαρμακευτικών υλικών και ο βιότοπος είναι ένας σημαντικός παράγοντας που επηρεάζει την ποιότητα αυτών των υλικών. Από τότε που το YCH άρχισε να χρησιμοποιείται ως φάρμακο, κυριαρχεί εδώ και πολύ καιρό το άγριο YCH. Μετά την επιτυχή εισαγωγή και εξημέρωση του YCH στη Ningxia τη δεκαετία του 1980, η πηγή των φαρμακευτικών υλικών Yinchaihu μετατοπίστηκε σταδιακά από το άγριο στο καλλιεργημένο YCH. Σύμφωνα με προηγούμενη έρευνα σε πηγές YCH [
9] και την επιτόπια έρευνα της ερευνητικής μας ομάδας, υπάρχουν σημαντικές διαφορές στις περιοχές διανομής των καλλιεργούμενων και άγριων φαρμακευτικών υλικών. Το άγριο YCH διανέμεται κυρίως στην αυτόνομη περιοχή Ningxia Hui της επαρχίας Shaanxi, δίπλα στην άνυδρη ζώνη της Εσωτερικής Μογγολίας και της κεντρικής Ningxia. Ειδικότερα, η στέπα της ερήμου σε αυτές τις περιοχές είναι ο καταλληλότερος βιότοπος για την ανάπτυξη YCH. Αντίθετα, το καλλιεργούμενο YCH διανέμεται κυρίως στα νότια της περιοχής εξάπλωσης της άγριας φύσης, όπως η κομητεία Tongxin (Καλλιέργεια I) και οι γύρω περιοχές, η οποία έχει γίνει η μεγαλύτερη βάση καλλιέργειας και παραγωγής στην Κίνα και η κομητεία Pengyang (Καλλιεργημένη II) , που βρίσκεται σε πιο νότια περιοχή και αποτελεί άλλη μια περιοχή παραγωγής για την καλλιεργούμενη ΥΧ. Επιπλέον, οι βιότοποι των δύο παραπάνω καλλιεργούμενων περιοχών δεν είναι ερημική στέπα. Επομένως, εκτός από τον τρόπο παραγωγής, υπάρχουν και σημαντικές διαφορές στον βιότοπο της άγριας και καλλιεργούμενης ΥΧ. Ο βιότοπος είναι ένας σημαντικός παράγοντας που επηρεάζει την ποιότητα των φυτικών φαρμακευτικών υλικών. Τα διαφορετικά ενδιαιτήματα θα επηρεάσουν τον σχηματισμό και τη συσσώρευση δευτερογενών μεταβολιτών στα φυτά, επηρεάζοντας έτσι την ποιότητα των φαρμακευτικών προϊόντων [
10,
11]. Ως εκ τούτου, οι σημαντικές διαφορές στα περιεχόμενα των συνολικών φλαβονοειδών και των συνολικών στερολών και η έκφραση των 53 μεταβολιτών που βρήκαμε σε αυτή τη μελέτη μπορεί να είναι αποτέλεσμα της διαχείρισης αγρού και των διαφορών των ενδιαιτημάτων.
Ένας από τους κύριους τρόπους με τους οποίους το περιβάλλον επηρεάζει την ποιότητα των φαρμακευτικών υλικών είναι η άσκηση πίεσης στα φυτά προέλευσης. Το μέτριο περιβαλλοντικό στρες τείνει να διεγείρει τη συσσώρευση δευτερογενών μεταβολιτών [
12,
13]. Η υπόθεση του ισοζυγίου ανάπτυξης/διαφοροποίησης δηλώνει ότι, όταν τα θρεπτικά συστατικά είναι σε επαρκή ποσότητα, τα φυτά αναπτύσσονται κυρίως, ενώ όταν τα θρεπτικά συστατικά είναι ελλιπή, τα φυτά διαφοροποιούνται κυρίως και παράγουν περισσότερους δευτερογενείς μεταβολίτες.
14]. Το στρες ξηρασίας που προκαλείται από την έλλειψη νερού είναι η κύρια περιβαλλοντική πίεση που αντιμετωπίζουν τα φυτά σε ξηρές περιοχές. Σε αυτή τη μελέτη, η κατάσταση του νερού του καλλιεργούμενου YCH είναι πιο άφθονη, με ετήσια επίπεδα βροχόπτωσης σημαντικά υψηλότερα από εκείνα για την άγρια YCH (η παροχή νερού για το Cultivated I ήταν περίπου 2 φορές εκείνη του Wild· το Cultivated II ήταν περίπου 3,5 φορές εκείνη του Wild ). Επιπλέον, το έδαφος στο άγριο περιβάλλον είναι αμμώδες έδαφος, αλλά το έδαφος στις γεωργικές εκτάσεις είναι αργιλώδες. Σε σύγκριση με τον άργιλο, το αμμώδες έδαφος έχει χαμηλή ικανότητα συγκράτησης νερού και είναι πιο πιθανό να επιδεινώσει το άγχος της ξηρασίας. Ταυτόχρονα, η διαδικασία καλλιέργειας συχνά συνοδεύτηκε από πότισμα, με αποτέλεσμα ο βαθμός ξηρασίας να είναι χαμηλός. Το Wild YCH αναπτύσσεται σε σκληρούς φυσικούς άνυδρους οικοτόπους και ως εκ τούτου μπορεί να υποστεί πιο σοβαρό στρες ξηρασίας.
Η ωσμορύθμιση είναι ένας σημαντικός φυσιολογικός μηχανισμός μέσω του οποίου τα φυτά αντιμετωπίζουν το στρες της ξηρασίας και τα αλκαλοειδή είναι σημαντικοί ωσμωτικοί ρυθμιστές στα ανώτερα φυτά.
15]. Οι βεταϊνες είναι υδατοδιαλυτές αλκαλοειδείς ενώσεις τεταρτοταγούς αμμωνίου και μπορούν να δράσουν ως οσμοπροστατευτικά. Το στρες ξηρασίας μπορεί να μειώσει το οσμωτικό δυναμικό των κυττάρων, ενώ τα οσμωπροστατευτικά διατηρούν και διατηρούν τη δομή και την ακεραιότητα των βιολογικών μακρομορίων και ανακουφίζουν αποτελεσματικά τη ζημιά που προκαλείται από το στρες ξηρασίας στα φυτά.
16]. Για παράδειγμα, υπό συνθήκες ξηρασίας, η περιεκτικότητα σε βεταΐνη του ζαχαρότευτλου και του Lycium barbarum αυξήθηκε σημαντικά [
17,
18]. Η τριγωνελίνη είναι ρυθμιστής της κυτταρικής ανάπτυξης και υπό συνθήκες ξηρασίας, μπορεί να επεκτείνει τη διάρκεια του κύκλου των φυτών, να αναστείλει την κυτταρική ανάπτυξη και να οδηγήσει σε συρρίκνωση του όγκου των κυττάρων. Η σχετική αύξηση της συγκέντρωσης διαλυμένης ουσίας στο κύτταρο επιτρέπει στο φυτό να επιτύχει οσμωτική ρύθμιση και να ενισχύει την ικανότητά του να αντιστέκεται στο στρες της ξηρασίας.
19]. JIA X [
20] διαπίστωσε ότι, με την αύξηση του στρες ξηρασίας, το Astragalus membranaceus (πηγή παραδοσιακής κινεζικής ιατρικής) παρήγαγε περισσότερη τριγωνελίνη, η οποία δρα στη ρύθμιση του οσμωτικού δυναμικού και στη βελτίωση της ικανότητας αντίστασης στο στρες της ξηρασίας. Τα φλαβονοειδή έχει επίσης αποδειχθεί ότι διαδραματίζουν σημαντικό ρόλο στην αντοχή των φυτών στο στρες της ξηρασίας.
21,
22]. Ένας μεγάλος αριθμός μελετών έχει επιβεβαιώσει ότι το μέτριο στρες ξηρασίας ευνοούσε τη συσσώρευση φλαβονοειδών. Οι Lang Duo-Yong et al. [
23] συνέκρινε τις επιπτώσεις της ξηρασίας στο YCH ελέγχοντας την ικανότητα συγκράτησης νερού στο χωράφι. Διαπιστώθηκε ότι το στρες ξηρασίας ανέστειλε την ανάπτυξη των ριζών σε κάποιο βαθμό, αλλά σε μέτρια και σοβαρή ξηρασία (40% ικανότητα συγκράτησης νερού στον αγρό), η συνολική περιεκτικότητα σε φλαβονοειδή στο YCH αυξήθηκε. Εν τω μεταξύ, υπό το στρες ξηρασίας, οι φυτοστερόλες μπορούν να δράσουν για να ρυθμίσουν τη ρευστότητα και τη διαπερατότητα της κυτταρικής μεμβράνης, να αναστείλουν την απώλεια νερού και να βελτιώσουν την αντίσταση στο στρες.
24,
25]. Επομένως, η αυξημένη συσσώρευση ολικών φλαβονοειδών, ολικών στερολών, βεταΐνης, τριγωνελίνης και άλλων δευτερογενών μεταβολιτών στο άγριο YCH μπορεί να σχετίζεται με στρες ξηρασίας υψηλής έντασης.
Σε αυτή τη μελέτη, πραγματοποιήθηκε ανάλυση εμπλουτισμού της οδού KEGG στους μεταβολίτες που βρέθηκαν να διαφέρουν σημαντικά μεταξύ της άγριας και της καλλιεργούμενης YCH. Οι εμπλουτισμένοι μεταβολίτες περιελάμβαναν εκείνους που εμπλέκονται στις οδούς του μεταβολισμού ασκορβικού και αλδαρινικού, στη βιοσύνθεση αμινοακυλο-tRNA, στο μεταβολισμό της ιστιδίνης και στο μεταβολισμό της βήτα-αλανίνης. Αυτά τα μεταβολικά μονοπάτια σχετίζονται στενά με τους μηχανισμούς αντοχής των φυτών στο στρες. Μεταξύ αυτών, ο μεταβολισμός του ασκορβικού παίζει σημαντικό ρόλο στην παραγωγή αντιοξειδωτικών φυτών, στον μεταβολισμό του άνθρακα και του αζώτου, στην αντίσταση στο στρες και σε άλλες φυσιολογικές λειτουργίες.
26]; Η βιοσύνθεση αμινοακυλο-tRNA είναι μια σημαντική οδός για τον σχηματισμό πρωτεϊνών [
27,
28], η οποία εμπλέκεται στη σύνθεση πρωτεϊνών ανθεκτικών στο στρες. Τόσο οι οδοί της ιστιδίνης όσο και της β-αλανίνης μπορούν να ενισχύσουν την ανεκτικότητα των φυτών στο περιβαλλοντικό στρες [
29,
30]. Αυτό δείχνει περαιτέρω ότι οι διαφορές στους μεταβολίτες μεταξύ του άγριου και του καλλιεργημένου YCH σχετίζονταν στενά με τις διαδικασίες αντοχής στο στρες.
Το έδαφος είναι η υλική βάση για την ανάπτυξη και την ανάπτυξη των φαρμακευτικών φυτών. Το άζωτο (Ν), ο φώσφορος (Ρ) και το κάλιο (Κ) στο έδαφος είναι σημαντικά θρεπτικά στοιχεία για την ανάπτυξη και την ανάπτυξη των φυτών. Η οργανική ύλη του εδάφους περιέχει επίσης N, P, K, Zn, Ca, Mg και άλλα μακροστοιχεία και ιχνοστοιχεία που απαιτούνται για τα φαρμακευτικά φυτά. Τα υπερβολικά ή ελλιπή θρεπτικά συστατικά ή οι μη ισορροπημένες αναλογίες θρεπτικών ουσιών θα επηρεάσουν την ανάπτυξη και την ανάπτυξη και την ποιότητα των φαρμακευτικών υλικών, και διαφορετικά φυτά έχουν διαφορετικές απαιτήσεις σε θρεπτικά συστατικά.
31,
32,
33]. Για παράδειγμα, ένα χαμηλό στρες Ν προήγαγε τη σύνθεση αλκαλοειδών στο Isatis indigotica και ήταν ευεργετικό για τη συσσώρευση φλαβονοειδών σε φυτά όπως το Tetrastigma hemsleyanum, το Crataegus pinnatifida Bunge και το Dichondra repens Forst. Αντίθετα, πάρα πολύ Ν ανέστειλε τη συσσώρευση φλαβονοειδών σε είδη όπως το Erigeron breviscapus, το Abrus cantoniensis και το Ginkgo biloba και επηρέασε την ποιότητα των φαρμακευτικών υλικών.
34]. Η εφαρμογή λιπάσματος P ήταν αποτελεσματική στην αύξηση της περιεκτικότητας σε γλυκυρριζικό οξύ και διυδροακετόνη στη γλυκόριζα Ural [
35]. Όταν η ποσότητα εφαρμογής ξεπέρασε τα 0,12 kg·m−2, η συνολική περιεκτικότητα σε φλαβονοειδή στο Tussilago farfara μειώθηκε [
36]. Η εφαρμογή ενός λιπάσματος P είχε αρνητική επίδραση στην περιεκτικότητα σε πολυσακχαρίτες στην παραδοσιακή κινεζική ιατρική rhizoma polygonati [
37], αλλά ένα λίπασμα Κ ήταν αποτελεσματικό στην αύξηση της περιεκτικότητάς του σε σαπωνίνες [
38]. Η εφαρμογή λιπάσματος 450 kg·hm−2 K ήταν η καλύτερη για την ανάπτυξη και τη συσσώρευση σαπωνίνης του Panax notoginseng ηλικίας δύο ετών [
39]. Κάτω από την αναλογία N:P:K = 2:2:1, οι συνολικές ποσότητες υδροθερμικού εκχυλίσματος, αρπαγίδης και αρπαγοσίδης ήταν οι υψηλότερες [
40]. Η υψηλή αναλογία N, P και K ήταν ευεργετική για την προώθηση της ανάπτυξης του Pogostemon cablin και την αύξηση της περιεκτικότητας σε πτητικό λάδι. Μια χαμηλή αναλογία N, P και K αύξησε την περιεκτικότητα των κύριων αποτελεσματικών συστατικών του ελαίου βλαστοκυττάρων Pogostemon [
41]. Το YCH είναι φυτό ανθεκτικό στο άγονο έδαφος και μπορεί να έχει συγκεκριμένες απαιτήσεις για θρεπτικά συστατικά όπως το N, P και K. Σε αυτή τη μελέτη, σε σύγκριση με το καλλιεργούμενο YCH, το έδαφος των άγριων φυτών YCH ήταν σχετικά άγονο: το περιεχόμενο του εδάφους οργανικής ύλης, το συνολικό Ν, το ολικό Ρ και το ολικό Κ ήταν περίπου 1/10, 1/2, 1/3 και 1/3 αυτών των καλλιεργούμενων φυτών, αντίστοιχα. Επομένως, οι διαφορές στα θρεπτικά συστατικά του εδάφους μπορεί να είναι ένας άλλος λόγος για τις διαφορές μεταξύ των μεταβολιτών που ανιχνεύονται στο καλλιεργούμενο και στο άγριο YCH. Weibao Ma et al. [
42] διαπίστωσε ότι η εφαρμογή ορισμένης ποσότητας λιπάσματος Ν και λιπάσματος P βελτίωσε σημαντικά την απόδοση και την ποιότητα των σπόρων. Ωστόσο, η επίδραση των θρεπτικών στοιχείων στην ποιότητα του YCH δεν είναι σαφής και τα μέτρα λίπανσης για τη βελτίωση της ποιότητας των φαρμακευτικών υλικών χρειάζονται περαιτέρω μελέτη.
Τα κινεζικά φυτικά φάρμακα έχουν τα χαρακτηριστικά των «ευνοϊκών οικοτόπων προάγουν την απόδοση και τα δυσμενή ενδιαιτήματα βελτιώνουν την ποιότητα» [
43]. Στη διαδικασία της σταδιακής μετάβασης από την άγρια σε καλλιεργούμενη ΥCH, ο βιότοπος των φυτών άλλαξε από την άνυδρη και άγονη στέπα της ερήμου σε εύφορη γεωργική γη με περισσότερο άφθονο νερό. Ο βιότοπος του καλλιεργούμενου YCH είναι ανώτερος και η απόδοση είναι υψηλότερη, κάτι που βοηθά στην κάλυψη της ζήτησης της αγοράς. Ωστόσο, αυτός ο ανώτερος βιότοπος οδήγησε σε σημαντικές αλλαγές στους μεταβολίτες του YCH. Το εάν αυτό συμβάλλει στη βελτίωση της ποιότητας του YCH και πώς να επιτευχθεί μια υψηλής ποιότητας παραγωγή YCH μέσω επιστημονικών καλλιεργητικών μέτρων θα απαιτήσει περαιτέρω έρευνα.
Η προσομοιωτική καλλιέργεια ενδιαιτημάτων είναι μια μέθοδος προσομοίωσης του οικοτόπου και των περιβαλλοντικών συνθηκών των άγριων φαρμακευτικών φυτών, που βασίζεται στη γνώση της μακροπρόθεσμης προσαρμογής των φυτών σε συγκεκριμένες περιβαλλοντικές πιέσεις.
43]. Με την προσομοίωση διάφορων περιβαλλοντικών παραγόντων που επηρεάζουν τα άγρια φυτά, ειδικά τον αρχικό βιότοπο των φυτών που χρησιμοποιούνται ως πηγές αυθεντικών φαρμακευτικών υλικών, η προσέγγιση χρησιμοποιεί επιστημονικό σχεδιασμό και καινοτόμο ανθρώπινη παρέμβαση για να εξισορροπήσει την ανάπτυξη και τον δευτερογενή μεταβολισμό των κινεζικών φαρμακευτικών φυτών.
43]. Οι μέθοδοι στοχεύουν στην επίτευξη των βέλτιστων διευθετήσεων για την ανάπτυξη ιατρικών υλικών υψηλής ποιότητας. Η προσομοιωτική καλλιέργεια ενδιαιτημάτων θα πρέπει να παρέχει έναν αποτελεσματικό τρόπο για την υψηλής ποιότητας παραγωγή YCH ακόμη και όταν η φαρμακοδυναμική βάση, οι δείκτες ποιότητας και οι μηχανισμοί απόκρισης στους περιβαλλοντικούς παράγοντες είναι ασαφείς. Αντίστοιχα, προτείνουμε να πραγματοποιηθούν μέτρα επιστημονικού σχεδιασμού και διαχείρισης πεδίου στην καλλιέργεια και παραγωγή YCH με αναφορά στα περιβαλλοντικά χαρακτηριστικά του άγριου YCH, όπως οι συνθήκες ξηρού, άγονου και αμμώδους εδάφους. Ταυτόχρονα, ελπίζεται επίσης ότι οι ερευνητές θα διεξαγάγουν πιο εις βάθος έρευνα σχετικά με τη λειτουργική υλική βάση και τους δείκτες ποιότητας του YCH. Αυτές οι μελέτες μπορούν να παρέχουν πιο αποτελεσματικά κριτήρια αξιολόγησης για το YCH και να προωθήσουν την παραγωγή υψηλής ποιότητας και τη βιώσιμη ανάπτυξη του κλάδου.